现在市场上
日本岛津色谱柱种类繁多,不同类型的色谱柱分离对象不同,因此,必须学会精准选择液相色谱柱,在选择色谱柱之前一定的认识和了解色谱柱的一些基本知识。今天从分离模式选择、样品信息、色谱柱参数等方面与大家聊一聊如何精准选择一款合适的
日本岛津色谱柱。
1、分离模式
液相色谱柱种类繁多,在精准选择液相色谱柱之前,首先必须选择HPLC的分离模式,根据使用的固定相和流动相的组合不同,可以得到下列各种各样的分离模式。
2、了解样品
了解待检样品的结构、分子量、溶解性、离子化、极性、pH值等物理化学性质,再参照下图选择适合的分离模式和精准的液相色谱柱固定相:
3、色谱柱参数
色谱柱性能影响因素有很多,例如,硅胶纯度、色谱柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积、孔径,化学性质包括键合类型、碳覆盖率、封端,下面依次介绍各参数对色谱柱性能的影响,并根据以上参数精准地选择液相色谱柱。
(1)硅胶纯度
硅胶纯度对强极性化合物的分离最为重要,残留金属离子浓度、硅胶的杂质会影响化合物的峰形,硅胶表面的金属含量高会影响碱性化合物的峰形,易发生拖尾。
(2)色谱柱尺寸
增加色谱柱长度,可以在一定程度上提高柱效,但也会升高压力和导致峰展宽;含量测定、溶出检测等对于分离的要求较低,可选用较短的色谱柱,减少运行时间。内径大,提高载样量,但也会增加横向扩散,同样会导致峰展宽。内径小的色谱柱灵敏度较高,峰型更窄,但是载样量较小。